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赭曲霉毒素(OTA)免疫層析親和柱產品說明書

     更新時間:2019-06-05       瀏覽量:

一、產品用途:
本產品可選擇性吸附樣品提取液中的赭曲霉毒素,從而對樣品液中的赭曲霉毒素起到非常針對性的純化作用,過柱純化后的樣品液純度被提高,可用于不同分析方法的測定。
二、產品概述:
赭曲霉毒素是一類真菌(如赭曲霉和純綠青霉)的有毒性的代謝產物,這類產毒素的真菌廣泛生棲在糧食及某些青干飼草中,產生毒素。動物食用被其污染的原料生產的飼料,可引起中毒。OTA對食品污染的范圍較廣,包括谷物、豆類、葡萄干、啤酒和葡萄汁等。
三、反應原理:
本產品測定的原理是抗原抗體反應。赭曲霉毒素單克隆抗體固定于柱內凝膠上,樣品中的赭曲霉毒素經過提取、過濾、稀釋,然后緩慢通過赭曲霉毒素免疫親和柱,在柱內赭曲霉毒素與抗體特異性結合,之后洗滌免疫親和柱,除去未結合的其他物質。用乙酸甲醇洗脫赭曲霉毒素,注入到分析儀器中進行檢測。
四、產品包裝組成:
每盒中包含25支赭曲霉毒素免疫親和柱及1套相應說明書。
五、IAC性能:
1、性能參數

2、交叉反應率

六、注意事項:
1、赭曲霉毒素對人體有害,應戴手套操作。
2、使用過的玻璃容器及赭曲霉毒素溶液最好用5%
濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存,不可凍存。
5、使用前,免疫親和柱需回至室溫(22-25℃)。
6、取樣量:根據實際情況可以適當增減,但不可太少,同時提取液體積要按比例隨之改變。
7、pH:上柱液pH要在6~8之間,若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。
七、需要的材料但盒中不提供:

八、試劑配制:
1、提取液:甲醇-水(8:2)
移取800mL甲醇,加一級水200mL混合。
2、磷酸鹽緩沖溶液(以下簡稱PBS):稱取8.00g氯化鈉,1.20g磷酸氫二鈉,0.20g磷酸二氫鉀,0.20g氯化鉀,用900mL蒸餾水溶解,然后用鹽酸調節pH值至7.4,最后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。
3、洗脫液:2%乙酸甲醇
移取2mL乙酸,加98mL甲醇混合。
九、樣品處理:真菌毒素分析的最大誤差來源是樣品的收集和取樣過程,所以要保證樣品收集和取樣的代表性。
(一)一般固體樣品

1、稱取5g試樣(精確到0.01g)于50ml離心管中;
2、加20.0mL提取液,渦旋混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min(或高速均質3min);
3、在5000r/min下離心10min(或均質后用玻璃纖維濾紙過濾至澄清);
4、取濾液4ml,加入24ml PBS,混勻(如混濁,請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清)
(二)植物油脂
1、稱取5g試樣(精確到0.01g)于50ml離心管中;
2、加20.0mL提取液,渦旋混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min(或高速均質3min);
3、5000r/min離心10min,取上清液備用;
4、取濾液4ml,加入24ml PBS溶液,混勻,(如混濁,請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清)
(三)醬油、食醋、咖啡、酒類
1、稱取5g試樣(精確到0.01g)于50ml離心管中;
2、用甲醇定容至25ml(精確至0.1mL),渦旋混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min(或高速均質3min)
3、在5000r/min下離心10min(或均質后用玻璃纖維濾紙過濾至澄清);
4、取濾液4ml,加入,加入24ml PBS溶液,混勻,(如混濁,請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清)
十、操作程序:符合國標GB 5009.96-2016
1、連接:將免疫親和柱后蓋取下,用剪刀剪開,重
新蓋上,連接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上樣:移取上述提取液移至注射器內,打開下端堵頭;
3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接,調節壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱,建議重力過柱;
4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗,棄去全部流出液,并使2-3mL空氣通過柱體;
5、洗脫:為保證洗脫充分,以2ml 2%乙酸甲醇進行洗脫,重力洗脫即可。首先,將免疫親和柱內液體排干,加1.0mL乙酸甲醇于柱管內,重力過柱,當溶劑通過柱子后;再加入1.0mL乙酸甲醇重復上述洗脫步驟,最后輕微加壓排凈洗脫液,合并洗脫液,將洗脫液濃縮吹干,用1mL流動相復溶,渦旋30s溶解殘余物,0.22μm濾膜過濾,待測。
十一、操作流程圖示


產品信息:
產品名稱:赭曲霉毒素免疫親和柱
產品貨號: LD-004
產品描述:赭曲霉毒素單克隆抗體
包裝單位:25支/盒
儲存條件:2~8℃,切勿冷凍
保質期:18個月

本公司可提供的真菌毒素檢測產品

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編輯:熊方方




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