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嘔吐毒素(DON)免疫層析親和柱產品說明書

     更新時間:2019-06-05       瀏覽量:

 

一、產品用途:
本產品可選擇性吸附樣品提取液中的嘔吐毒素,從而對樣品液中的嘔吐毒素起到非常針對性的純化作用,過柱純化后的樣品液純度被提高,可用于不同分析方法的測定。
二、產品概述:
嘔吐毒素主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產生廣泛的毒性效應。它還常與其它的霉菌毒素如黃曲霉毒素共同污染農作物,進入人體后可以相互影響,對人類及動物的健康構成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物,在體內可能有一定的蓄積,但無特殊的靶器官,具有很強的細胞毒性。
三、反應原理:
本產品測定的原理是抗原、抗體反應,抗體連接在柱體內,樣品經過提取、過濾后,緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和柱,在免疫親和柱內毒素與抗體結合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他無關物質。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,經氮氣吹干復溶后注入到分析儀器中用于檢測。
四、產品包裝組成:
每盒中包含25支黃曲霉毒素B1免疫親和柱及1套相應說明書。
五、IAC性能:
1、性能參數

2、交叉反應率

六、注意事項:
1、嘔吐毒素可致癌,應戴手套口罩等防護工具操作。
2、使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液最好用5%
濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存,不可凍存。
5、使用前,免疫親和柱需回至室溫(22-25℃)。
6、取樣量:根據實際情況可以適當增減,但不可太少,同時提取液體積要按比例隨之改變。
7、pH:上柱液pH要在6~8之間,若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。
七、需要的材料但盒中不提供:

八、試劑配制:

1、磷酸鹽緩沖溶液(以下簡稱PBS):稱取8.00g氯化鈉,1.20g磷酸氫二鈉,0.20g磷酸二氫鉀,0.20g氯化鉀,用900mL蒸餾水溶解,然后用鹽酸調節pH值至7.4,最后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。
2、乙腈-水(8+2):取800mL 乙腈,加入200mL 去離子水。
九、樣品處理:真菌毒素分析的最大誤差來源是樣品的收集和取樣過程,所以要保證樣品收集和取樣的代表性。
(一)玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補料等吸水性較小的樣本(稀釋倍數:2倍)
1、5g±0.01g 樣品(固體樣品需粉碎,并過1mm 分樣篩),20mL 水;
2、高速均質1min,或用搖床200r/min~300r/min 劇烈振蕩20min;
3、5000r/min離心10min,取上清液備用;
4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
(二)麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強的樣本(稀釋倍數:2倍)
1、4g±0.01g 樣品(固體樣品需粉碎,并過1mm 分樣篩),40mL 水;
2、高速均質1min,或用搖床200r/min~300r/min 劇烈振蕩20min;
3、5000r/min離心10min,取上清液備用;
4、取10mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
(三)醬油、食醋、醬及醬制品(稀釋倍數:2倍)
1、稱取樣品5g(準確到0.1g),用水定容至20mL,混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中超聲或振蕩20min。
3、5000r/min離心10min,取上清液備用;
4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
(四)酒類(稀釋倍數:2倍)
1、取酒樣5g(準確到0.1g),加入1g 聚乙二醇,用水定容至20mL,混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中超聲或振蕩20min;
3、5000r/min離心10min,取上清液備用;
4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
(五)嬰幼兒米粉(稀釋倍數:2倍)
1、5g±0.01g 樣品,加入20mL 乙腈-水(8+2);
2、高速均質1min,或用搖床200r/min~300r/min劇烈振蕩20min;
3、5000r/min離心10min,取上清液備用;
4、取5mL 混勻后的液體,加入30mL PBS 緩沖液,混勻;
5、取24mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
十、操作程序:符合國標GB 5009.111-2016
1、連接:將免疫親和柱后蓋取下,用剪刀剪開,重
新蓋上,連接于泵流操作架的30mL注射器下;
2、上樣:移取上述提取液移至注射器內,打開下端堵頭;
3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接,調節壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱,建議重力過柱;
4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗,棄去全部流出液,并使2-3mL空氣通過柱體;
5、洗脫: 待液體排干后,上樣1mL 甲醇,流速1 滴/秒,收集洗脫液,并在50~60℃加熱條件下N2 氣吹干,然后用1mL 流動相復溶;-復溶液用0.22μm 微孔濾器過濾后轉移至樣品瓶中用于HPLC或LC-MS 等儀器分析。
十一、操作流程圖示


產品信息:
產品名稱:嘔吐毒素免疫親和柱
  產品貨號:LD-003
  產品描述:嘔吐毒素單克隆抗體
  包裝單位:25支/盒
  儲存條件:2~8℃,切勿冷凍
  保質期:18個月

本公司可提供的真菌毒素檢測產品

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編輯:熊方方




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