豬偽狂犬病毒抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書

     更新時間:2019-06-19       瀏覽量:
【產品簡介】
        豬偽狂犬?。≒R)是一種高度接觸性、急性傳染病,給國內養豬業造成巨大的損失。在豬偽狂犬的免疫預防工作中,接種了豬偽狂犬疫苗后,由于多種因素可能導致豬不產生或產生低水平豬偽狂犬病毒抗體。
        gD蛋白是PRV結構蛋白,是PRV的主要保護性抗原蛋白,可誘導機體產生保護性抗體。本試劑盒采用酶聯免疫吸附試驗檢測豬血清中抗PRV gD蛋白抗體IgG。用于免疫豬偽狂犬疫苗后的抗體動態水平監測,指導免疫預防工作,評估豬場豬偽狂犬免疫狀況,也可用于豬偽狂犬的流行病學調查。
【產品內容】
試劑盒主要成分  
包被板 96T×2
陽性對照  1ml×1
陰性對照  1ml×1
酶標結合物 20ml×1
樣品稀釋液  50ml×1
底物液  20ml×1
終止液 15ml×1
20×濃縮洗滌液 50ml×1
封口膠 2份
說明書 1份
【成分性狀】 
包被板 96孔塑制微孔板,無色透明,干燥,無雜質吸附
酶標結合物 略帶黃色澄明液體
陰、陽性對照 略帶黃色澄明液體
樣品稀釋液 無色或略帶黃色澄明液體
濃縮洗滌液 無色或略帶黃色澄明液體
底物液 無色或微藍色澄明液體
終止液 無色澄明液體,低溫條件下可能會出現絮狀沉淀
【用法與判定】 按以下步驟進行:
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器;
1.2 微量移液器配套使用的槍頭;
1.3 用來稀釋洗滌液的500 ml量筒;
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀;
1.5 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管;
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備  
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行50倍稀釋(建議:4μl血清樣品加入196μl樣品稀釋液中),樣品加入包被板前要充分混勻,稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。
注意:制備血清用的血液樣本應無溶血現象發生;②不能稀釋陰性、陽性對照。
3、操作步驟 (﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻,所有試劑應平衡至室溫
3.1  在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對照;
3.2  在A3和A4孔中分別加入100μl陽性對照;
3.3  取100μl稀釋好的待檢樣品加入相應孔中,并做好記錄;
3.4  37℃孵育30min;
3.5  將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶,需先溶解后,方可進行稀釋)進行洗板,重復5次,每次30s;
﹡加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果,盡量將孔內洗滌液拋甩干凈;
3.6  每孔加100μl酶標結合物;
3.7  37℃孵育30min;重復步驟3.5;
3.9  每孔加100μl底物液;
3.9  37℃孵育10min(避光顯色);
3.10 每孔加50μl的終止液;
3.11 立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值,即OD450值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照:正常情況下,陰性對照OD450值≤0.3;
4.2陽性對照:正常情況下,陽性對照OD450值≥0.6;
4.3臨界值(C.O.)的計算:臨界值=0.18+陰性對照均值;陰性對照OD450值大于0.3時應舍棄,如所有陰性對照OD450值都大于0.3時須重復實驗;陰性對照于0.05時以0.05計算。
4.4結果判定:檢測樣品OD450值≥臨界值,判定該檢測樣品為陽性;檢測樣品OD450值<臨界值,判定該檢測樣品為陰性。
【注意事項】
(1)待檢血清樣品數量過多時,應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后,再統一將血清樣品加入酶標板中,使反應時間一致。
(2)試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。
(3)底物液和終止液對皮膚有刺激性,注意防護。
(4)底物液不要暴露于強光和任何氧化劑;使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
(5)所有試劑應在2~8℃存放;使用前恢復到室溫,使用后放回2~8℃。
(6)注意防止試劑盒組分受到污染。
(7)不要使用超過有效期的試劑,不同批次試劑盒的組分不要混用。
(8)操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。
【規格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2~8℃避光保存,有效期為12個月
【聯系人】 王金良                                   電話:0543-3403060
僅供獸醫診斷使用



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編輯:熊方方




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