動物包蟲抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書

     更新時間:2019-06-19       瀏覽量:
【產品名稱】
通用名稱:動物包蟲抗體ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Hydatid( Hyd) Antibody Test Kit for Livestock
【用途】本試劑盒采用夾心ELISA方法定性檢測動物血清或血漿中的特異性包蟲抗體,可作為包蟲病輔助檢測。
規格】96T/盒,192T/盒。
【儲藏與有效期】2~8℃保存,有效期12個月。
【試劑盒組成】
名稱 數量 名稱 數量
抗原包被板 96T/192T 終止液 15mL
酶標結合物 12mL/22mL 陽性對照 1mL
洗滌液10× 100mL 陰性對照 1mL
底物液 15mL 封板膜 3片/6片
顯色液 15mL 說明書 1份
樣品稀釋液 25mL    
 
【溶液配制】洗滌液(1×PBST):將本試劑盒配備的洗滌液10×用無離子水或超純水作1:10稀釋后即為工作濃度的洗滌液。
【實驗準備】所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。
【樣品要求】
1. 本試劑僅適用于檢測牛、羊等血清或血漿。
2. 為取得最佳實驗效果,避免使用含疊氮鈉、高血脂、長菌以及嚴重溶血的樣品;
3. 短期(3天內)將進行檢測的血清樣品可存放于 2~8℃;如需長期保存,應置于-20℃
以下,避免反復凍融。
【操作步驟】
1.加樣品稀釋液:每孔加樣品稀釋液50 μL。
2.加樣反應:樣品孔,每孔僅加入50μL待檢樣品;陰性對照2孔,每孔僅加入50μL陰性對照品;陽性對照2孔,每孔僅加入50μL陽性對照品。蓋好封板膜,37℃避光反應 30分鐘。
3.洗板:甩去孔內液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘;最后一次甩凈,拍干。
4.加酶反應:每孔加酶標結合物100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應 30 分鐘。甩去孔內液體,如上洗板,拍干。
5.顯色反應:按所需用量,臨用前取等體積底物液和顯色液充分混勻,每孔加100 μL,蓋好封板膜,37℃避光反應10分鐘。
6.終止反應:加終止液50μL,用酶標儀于450nm波長(630nm作為參比波長)讀取OD值。
【結果判定】
1. Cut-off值(COV)=陰性對照平均OD值×2.1 (陰性對照孔OD 值<0.1 時,按0.1 計)。
2. 有效性判定:
陰性對照孔OD值≤0.15(若大于0.15則實驗無效);
陽性對照孔OD值≥0.30(若小于0.30則實驗無效)。
判定標準
樣品OD值≥COV,判為包蟲抗體陽性;
樣品OD值<COV,判為包蟲抗體陰性。
【檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查,不作為確診依據。
【注意事項】
1. 所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。
2. 加試劑前應將試劑輕搖、混勻。。
3. 包被板反應時嚴禁堆疊放置,應該平鋪且板間有空隙,不要離溫箱壁太近。
4. 實驗所用移液器及設備應定期校準。
5. 孵育時必須用封板膜密封板孔,封板膜不可以重復使用。
6. 底物液和終止液對皮膚有刺激性,請帶手套注意個人防護。 
【技術支持】 王金良                                   電話:0543-3403060
僅供獸醫診斷使用



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編輯:熊方方




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