豬瘟病毒抗體檢測試劑盒說明書

     更新時間:2019-06-19       瀏覽量:
 【產品簡介】
       
本試劑盒采用ELISA 方法定性檢測豬血清或血漿中的特異性豬瘟病毒抗體,可作為豬瘟病毒疫苗的免疫監測及該病的輔助檢測。如果待檢樣品中含有豬瘟病毒抗體,就會阻斷豬瘟單克隆抗體酶標結合物與豬瘟重組抗原包被的微量反應板結合。結合在包被板上的豬瘟單克隆抗體酶標結合物與底物反應的顯色狀況即可反映出樣品中是否含有保護水平的豬瘟病毒抗體。
【產品內容】
序號 名稱 規格 序號 名稱 規格
1 包被板 96孔 7 終止液(6號液) 15 mL
2 酶標結合物(1號液) 12mL 8 陽性對照品 1 mL
3 洗滌液10×(2號液) 100mL 9 陰性對照品 1 mL
4 底物液(3號液) 15 mL 10 封板膜 3片
5 顯色液(4號液) 15 mL 11 說明書 1份
6 樣品稀釋液(5號液) 40mL      
【用法與判定】 按以下步驟進行:
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器及配套使用的槍頭;
1.2用來稀釋洗滌液的500 ml量筒;
1.3 適用于檢測96T微孔板的酶標儀;
1.4 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管;
1.5 蒸餾水或去離子水。
2、樣品要求
1. 本試劑僅適用于檢測豬血清或血漿。
2. 為取得最佳實驗效果,避免使用含疊氮鈉、高血脂、長菌以及嚴重溶血的樣品;
3. 短期(3天內)將進行檢測的血清樣品可存放于2~8℃;如需長期保存,應置于-20℃以下,避免反復凍融。
3、檢驗方法
1. 洗滌液配制:用蒸餾水或去離子水將洗滌液10×(2號液)按1:10 稀釋(例如,取100mL 洗滌液10×,加900mL 蒸餾水或去離子水混合),充分混勻即為工作濃度洗滌液。
2. 加樣品稀釋液:每孔加樣品稀釋液50μL。
3. 加樣反應:樣品孔,每孔僅加入50μL 待檢樣品;空白對照2 孔,每孔僅加入50μL 樣品稀釋液;陰性對照2 孔,每孔僅加入50μL 陰性對照品;陽性對照2 孔,每孔僅加入50μL 陽性對照品。蓋好封板膜,37℃避光反應60 分鐘。
4. 洗板:甩去孔內液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3 次,每次均需停留1 分鐘;最后一次甩凈,拍干。
5. 加酶反應:除空白對照孔外,其余每孔加酶標結合物(1 號液)100μL,蓋好封板膜, 37℃避光反應60 分鐘。甩去孔內液體,如上洗板,拍干。
6. 顯色反應:按所需用量,臨用前取等體積底物液(3 號液)和顯色液(4 號液)充分混勻,每孔加100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應15 分鐘。
7. 終止反應: 加終止液(6 號液)50μL,以空白對照調零,用酶標儀于450nm 波長(630nm 作為參比波長)讀取OD 值。
參考值
1. 阻斷率(PI)的計算方法:

2. 有效性判定:
陰性對照孔OD 值≥0.5(若小于0.5 則實驗無效);
陽性對照孔PI≥35%(若小于35%則實驗無效)。
檢驗結果的解釋
樣品PI≥35%,判為豬瘟病毒抗體陽性;
樣品PI<35%,判為豬瘟病毒抗體陰性。
檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查,不作為確診依據。
注意事項
1. 試劑盒各組份從冷藏環境中取出時,必須平衡至室溫后,方可開封啟用。未使用完的試劑組份應及時放回2~8℃密封保存。
2. 加試劑前應將試劑輕搖、混勻。
3. 孵育時必須用封板膜密封板孔,封板膜不可以重復使用。
4. 不同批次試劑盒的試劑組份或說明書不可混用。瓶蓋每次使用后要蓋緊,各瓶之間瓶蓋不可混用。
5. 用棄的試劑盒及樣品都應按污染物妥善處理。試劑盒內終止液有腐蝕性,須小心使用。
【規格與包裝】96份/盒
【貯藏與有效期】2~8℃避光保存,防止冷凍,有效期為12個月
【聯系人】 王金良                                   電話:0543-3403060
僅供獸醫診斷使用



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編輯:熊方方




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