口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測試劑盒使用說明書

     更新時間:2019-06-19       瀏覽量:
【產品名稱】
通用名稱:口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測試劑盒
【用途】本試劑盒是利用口蹄疫病毒重組3ABC非結構蛋白包被ELISA板,并由該蛋白特異的單抗作為競爭抗體建立的競爭ELISA方法。
規格】 2塊96孔ELISA板。
【儲藏與有效期】 2~8℃保存,有效期12個月。
【試劑盒組成】
名稱 數量 名稱 數量
3ABC蛋白包被ELISA板 2塊(96孔) 終止液 20mL
底物液 20mL 陽性對照 2mL
20X洗滌液 50mL 陰性對照 2mL
酶標結合物 20mL 封板膜 2片
樣品稀釋液 50mL 說明書 1份
【溶液配制】 20X洗滌液(20×PBST):將本試劑盒配備的洗滌液20×用無離子水或超純水作1:20稀釋后即為工作濃度的洗滌液。
【實驗準備】所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。
【操作步驟】
1.加樣品   陰性對照(A1B1)、陽性對照(C1D1)對照均作2孔平行,直接在相應孔內加入50ul對照血清。被檢樣品作1:5稀釋,預先在被檢樣品孔內加入30ul稀釋液,再加入20ul被檢血清,最后在所有孔內均加入50ul的HRP-單抗。反應體系即100ul/孔,混勻,37℃孵育30分鐘。
2.加底物液   用1倍PBST洗滌液洗板3遍,最后一次拍干,加入TMB底物液,50ul/孔,37℃孵育15分鐘,加入終止液50ul/孔,終止反應。
3.酶標儀450nm波長讀數。
【結果判定】

1.試驗成立判定
    兩孔陰性對照OD450nm值至少一孔OD值大于0.5;兩孔陽性對照至少一孔的P/N比值小于0.5。
2.S/N比值法判定結果
即S/N=樣品OD值/陰性對照OD值。
S/N≤0.5判為口蹄疫病毒非結構蛋白抗體陽性;S/N>0.5判為口蹄疫病毒非結構蛋白抗體陰性。
【注意事項】
1. 所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。
2. 實驗前應用溫度計檢查溫箱溫度,溫度過高或過低影響OD值高低。
3. 包被板反應時嚴禁堆疊放置,應該平鋪且板間有空隙,不要離溫箱壁太近。
4. 實驗所用移液器及設備應定期校準。
5. 采集的樣品要新鮮,并且最好不要溶血。血清標本在2~8℃放置不要超過2天,室溫不超過8小時,如需長時間放置應儲存于-20℃。
【技術支持】 王金良                          電話:0543-3403060
僅供獸醫診斷使用



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編輯:熊方方




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