【產品簡介】山羊痘（GTP）是由山羊痘病毒感染山羊引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病。在山羊痘的免疫預防工作中，接種了山羊痘疫苗后，由于多種因素可能導致羊不產生或產生低水平山羊痘病毒抗體。
本試劑盒采用酶聯免疫吸附試驗檢測羊血清中GTPV抗體，用于免疫山羊痘疫苗后的抗體動態水平監測，指導免疫預防工作，評估羊場山羊痘免疫狀況，也可用于山羊痘的流行病學調查。
【產品內容】

試劑盒主要成分	數 量
抗原包被板（GTPV）	96T×1
陽性對照	1ml×1
陰性對照	1ml×1
酶標結合物	10ml×1
樣品稀釋液	20ml×1
底物液	10ml×1
終止液	7ml×1
濃縮洗滌液（20×）	50ml×1
封口膠	1份
使用說明書	1份

【成分性狀】 

包被板	96孔塑制微孔板，無色透明，干燥，無雜質吸附
酶標結合物	略帶黃色澄明液體
陰、陽性對照	略帶黃色澄明液體
樣品稀釋液	無色或略帶黃色澄明液體
濃縮洗滌液	無色或略帶黃色澄明液體
底物液	無色或微藍色澄明液體
終止液	無色澄明液體，低溫條件下可能會出現絮狀沉淀

【用法與判定】 按以下步驟進行：
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的槍頭；
1.3 用來稀釋洗滌液的500 ml量筒；
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀；
1.5 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管；
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備 
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行40倍稀釋(建議：5μl血清樣品加入195μl樣品稀釋液中)，樣品加入包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意：①制備血清用的血液樣本應無溶血現象發生；②不能稀釋陰性、陽性對照。
3、操作步驟 （﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻，所有試劑應恢復至室溫）
3.1  在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對照；
3.2  在A3和A4孔中分別加入100μl陽性對照；
3.3  取100μl稀釋好的待檢樣品加入相應孔中，并做好記錄；
3.4  37℃孵育30min；
3.5  將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶，需先溶解后，方可進行稀釋）進行洗板，重復5次，每次30s；
*加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果，盡量將孔內洗滌液拋甩干凈；
3.6  每孔加100μl酶標結合物；
3.7  37℃孵育30min；重復步驟3.5；
3.8  每孔加50μl底物液；
3.9  37℃孵育10min（避光顯色）；
3.10  每孔加50μl的終止液；
3.11  立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值，即OD₄₅₀值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照孔OD₄₅₀值≤0.3；
4.2陽性對照：正常情況下，陽性對照孔OD₄₅₀值≥0.6；
4.3臨界值(C.O.)計算：臨界值=0.18+陰性對照均值；陰性對照OD₄₅₀值大于0.3時應舍棄，如所有陰性對照OD₄₅₀值均大于0.3時須重復實驗；陰性對照低于0.05時以0.05計算。
4.4結果判定： 檢測樣品OD₄₅₀值≥臨界值，判定該檢測樣品為陽性； 檢測樣品OD₄₅₀值＜臨界值，判定該檢測樣品為陰性。依據農業部山羊痘免疫和監測方案，免疫21天后，山羊痘病毒抗體ELISA檢測試驗抗體陽性判定為免疫合格。
【注意事項】
（1）待檢血清樣品數量過多時，應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后，再統一將血清樣品加入酶標板中，使反應時間一致。
（2）試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。
（3）底物液和終止液對皮膚有刺激性，注意防護。
（4）底物液不要暴露于強光和任何氧化劑；使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
（5）所有試劑應在2～8℃存放；使用前恢復到室溫，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止試劑盒組分受到污染。
（7）不要使用超過有效期的試劑，不同批次試劑盒的組分不要混用。
（8）操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。
【規格與包裝】96T×1
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為12個月
【聯系人】 王金良                                   電話：0543-3403060
僅供獸醫診斷使用